miR-93真核表达载体的构建及其表达验证

• 作者: 吴开杰 惠珂 王彬 王新阳 贺大林 黄军
• 来源期刊: 现代泌尿外科杂志
• 关键词: miR-93 表达载体 pEZX-MR04 293T
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 799-802
• 页数: 4页
• 分类号: R331
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-8291.2016.10.016

摘要

目的 构建人miR-93真核表达载体,并验证其表达效果,为进一步研究miR-93的生物学功能提供有利工具.方法 用PCR方法从293T细胞基因组DNA中扩增miR-93前体序列,引物引入酶切位点和保护碱基,产物用限制性内切酶EcoR Ⅰ和BglⅡ双酶切后插入pEZX-MR04表达载体中,构建miR-93真核表达载体pEZX-MR04-miR-93.构建好的载体用双酶切、PCR和测序鉴定,同时转染293T细胞,用Real time PCR检测重组pEZX-MR04-miR-93质粒的miR-93表达效率.结果 成功构建miR-93真核表达载体pEZX-MR04-miR-93,重组pEZX-MR04-miR-93质粒转染293T细胞后miR-93表达上升约21倍.结论 构建的miR-93真核表达载体pEZX-MR04-miR-93可显著上调细胞中miR-93水平,为进一步研究miR-93在泌尿系肿瘤中的生物学功能提供可靠工具,奠定了坚实的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王新阳	西安交通大学第一附属医院泌尿外科	63	273	8.0	12.0
2	黄军	西安交通大学第一附属医院泌尿外科	15	65	5.0	7.0
3	贺大林	西安交通大学第一附属医院泌尿外科	237	1371	16.0	23.0
4	吴开杰	西安交通大学第一附属医院泌尿外科	63	224	8.0	12.0
5	惠珂	西安交通大学第一附属医院泌尿外科	6	5	1.0	2.0
6	王彬	西安交通大学第一附属医院泌尿外科	38	409	11.0	19.0