S1P1真核表达载体的构建及在HEK293细胞膜上的表达

• 作者: 任碧轩 唐恩洁 敬保迁 杨健 胡为民
• 来源期刊: 川北医学院学报
• 关键词: S1P1 真核表达载体 HEK293细胞
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 22-25
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-3697.2008.01.006

摘要

目的 构建含人I型1-磷酸鞘氨醇受体(SIPI)-全长cDNA序列及HA和/或EGFP标签的真核表达载体,并观察其在HEK293细胞上的表达.方法 合成2条HA寡核苷酸,克隆人S1P1-Myc-EGFP-N1载体.以HA-S1P1-Myc-EGFP-N1为模板,用PCR的方法 扩增HA-S1P1并克隆人pcDNA3.1(+)载体.限制性酶切消化、PCR、测序的方法 鉴定,载体经Polyfect转染入HEK293细胞.G418筛选出稳定细胞株.用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测S1P1在HEK293细胞上的表达.结果 限制性酶切消化、PCR、测序结果 证实载体构建成功.S1P1表达在HEK293稳定细胞株的表面.结论 成功构建带有HA和/或EGFP标签的S1P1真核表达载体,表面表达S1P1的HEK293稳定细胞株可作为我们进一步研究的细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨健	川北医学院基础医学院微生物与免疫学教研室	46	93	5.0	7.0
2	敬保迁	川北医学院免疫学与分子生物学研究所	46	116	5.0	8.0
3	唐恩洁	川北医学院基础医学院微生物与免疫学教研室	57	248	9.0	13.0
7	胡为民	川北医学院基础医学院微生物与免疫学教研室	35	80	5.0	6.0
11	任碧轩	川北医学院免疫学与分子生物学研究所	22	81	5.0	8.0