人Ⅱ型大麻受体真核表达体系构建及其在 HEK293细胞中的表达

• 作者: 孙厚良 封玉玲 李晶 龙明
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: Ⅱ型大麻受体 基因克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2015,（29）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-16
• 页数: 3页
• 分类号: R394
• 字数: 3262字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2015.29.005

摘要

目的：构建人Ⅱ型大麻受体（ hCB2）基因GV230真核表达质粒，并检测hCB2基因在HEK293细胞中的表达。方法利用人脑皮质细胞的总RNA为模板，RT-PCR获得cDNA，通过酶切、连接及测序鉴定正确后，再将目的片段插入真核表达载体GV230，构建重组表达质粒GV230-hCB2，阳性克隆用脂质体瞬时转染HEK293细胞。激光共聚焦扫描显微镜和Western blotting法检测hCB2基因表达产物在细胞的表达情况。结果扩增出hCB2基因片段，成功构建了重组表达质粒，并检测到目的蛋白在转染细胞中表达，观察到hCB2受体在胞膜分布和表达。结论成功构建GV230-hCB2质粒，该质粒在HEK293细胞中能表达hCB2蛋白，此为进一步研究hCB2生物学功能奠定了实验基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龙明		27	67	5.0	7.0
2	孙厚良		36	80	5.0	6.0
3	封玉玲		22	75	4.0	8.0
4	李晶		50	109	5.0	9.0