AR-GFP融合基因真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

• 作者: 刘建伟 刘静 叶玲 杜明梅 牛东滨 高宇红
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 醛糖还原酶 绿色荧光蛋白 基因表达 HEK293细胞
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2138-2141
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 字数: 4691字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2008.11.012

摘要

目的:构建由绿色荧光蛋白(GFP)标记的人醛糖还原酶(AR)融合基因真核表达载体并在HEK293细胞中表达.方法:应用DNA重组技术构建AR与GFP的融合基因(AR-GFP),将AR-GFP插入peD-NA3.1/myc-HisA真核表达载体中,通过磷酸钙共沉淀转染HEK293细胞,倒置荧光显微镜评价转染效率,Westernblotting技术检测AR基因在转染细胞中的整合及表达,分光光度法(UV法)测定AR表达活性,用公认的AR抑制剂(ARI)反证活性AR的存在.结果:荧光显微镜对转染细胞的观察及Weatem blotting结果证实AR-GFP融合蛋白在HEK293细胞中表达,UV法测活、ARI抑制试验均未证实其生物学活性.结论:转染的HEK293细胞可成功地表达AR-GFP融合蛋白,但不能成为ARI真核细胞筛选模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高宇红	解放军总医院老年医学研究所	31	204	7.0	13.0
2	刘建伟	解放军总医院老年医学研究所	40	183	8.0	11.0
3	叶玲	解放军总医院老年医学研究所	35	149	7.0	10.0
4	刘静	解放军总医院老年医学研究所	48	240	10.0	13.0
5	杜明梅	解放军总医院老年医学研究所	27	317	12.0	17.0
6	牛东滨		1	1	1.0	1.0