波形蛋白真核表达质粒载体的构建及其在HepG2细胞中的表达

• 作者: 文艳君 李祖茂
• 来源期刊: 川北医学院学报
• 关键词: 波形蛋白 中间丝 质粒 人肝细胞癌细胞株
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 560-563
• 页数: 4页
• 分类号: R361
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-3697.2008.06.003

摘要

目的 构建重组人波形蛋白中间丝真核表达质粒载体pcDNA3.1-VIM并检测波形蛋白在肝癌HepG2细胞中的稳定表达.方法 通过RT-PCR技术从人胎盘组织总RNA中扩增波形蛋白基因,经限制性核酸内切酶BamHⅠ-EcoRⅠ消化,然后插入pcDNA3.1(+)载体,脂质体介导重组质粒和空质粒分别转染HepG2细胞,G418筛选稳定表达细胞株,采用免疫细胞化学技术检测目的基因的表达.结果 经DNA序列分析和限制性核酸内切酶消化,证实重组载体pcDNA3.1-VIM已正确克隆,建立的稳定细胞株高表达波形蛋白.结论 成功地构建了重组质粒pcDNA3.1-VIM载体和建立了稳定表达波形蛋白的人肝细胞癌细胞株,为进一步研究波形蛋白与癌细胞生物学行为之间的相互关系奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李祖茂	川北医学院基础医学病理学教研室	24	109	6.0	9.0
2	文艳君	四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室	24	39	4.0	4.0