sh-Set7/9表达载体的构建及其在 HepG2细胞中的功能

• 作者: 任雯 施星臣 施鑫鹤 李平 李晓强 秦龙 马克君
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: Set7/9 HepG2 细胞 Western blot 甲基转移酶 载体构建 肝癌
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 753-757
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201506008

摘要

目的：构建 sh-Set7/9表达载体并筛选稳定转染 HepG2细胞株,考察其干扰效果,为后续研究 Set7/9基因的功能及其在肝癌细胞系中的作用提供实验基础。方法寻找靶向序列,设计 siRNA 片段,构建针对人 Set7/9基因的shRNA 和对照载体,将干扰载体和载体稳定转染肝癌细胞 HepG2,Real-time PCR 检测细胞中 Set7/9基因的表达水平；同时利用 Western blot 方法在蛋白质水平进行检测,确定该基因的干扰效果。结果成功构建载体 Set7/9-shR-NA；Real-time PCR 结果显示该基因表达水平明显被抑制(P <0.05),同样 Western blot 检测表明其蛋白表达也显著下调。此外,与其相关的 Sirt1蛋白表达水平提高8.4倍,Suv39h1蛋白表达水平升高1.1倍。结论构建稳定转染株后,可以显著下调 Set7/9基因的表达,同时影响与其相关的 Sirt1和 Suv39h1蛋白表达水平,提示对肝癌 HepG2细胞活性产生影响。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李平	兰州大学第二医院中心实验室	88	569	10.0	21.0
2	秦龙	兰州大学第二医院药剂科	16	45	4.0	6.0
3	李晓强	兰州大学第二医院药剂科	19	117	6.0	10.0
4	施鑫鹤	兰州大学第二医院中心实验室	16	52	5.0	6.0
5	施星臣	兰州市第二人民医院骨科	7	5	1.0	2.0
6	马克君	兰州大学第二医院中心实验室	10	23	2.0	4.0
7	任雯	兰州大学第二医院中心实验室	5	4	2.0	2.0