Tip30真核表达载体的构建及其在HepG2细胞中的表达

• 作者: 刘勤 吴金术 李浩 潘一峰 王宪伟 王渊璟 龚连生
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 癌 肝细胞 基因表达 转染 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 58-62
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨人Tip30全长基因的真核表达载体pAAV-TIP30的构建,并观察其转染肝癌细胞株HepG2后的表达.方法:以正常人肝组织mRNA为模板,用RT-PCR方法扩增Tip30,利用限制性内切酶BamH I和Xba Ⅰ,将Tip30基因克隆到真核表达载体pAAV-MCS中,并经酶切和测序鉴定.重组质粒转染HepG2细胞,运用Western blot法检测Tip30蛋白表达.结果:RT-PCR方法正确地扩增出全长Tip30基因.限制性内切酶酶切和测序结果证实Tip30基因克隆完全正确.重组质粒转染肝癌细胞系HepG2后,Western blot证实Tip30蛋白表达增高.结论:成功构建了真核表达重组质粒pAAV-TIP30并转染HepG2细胞,为进一步研究Tip30基因对肝癌的影响及其机制打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴金术	湖南省人民医院肝胆外科	197	1163	17.0	25.0
2	李浩	湖南省人民医院肝胆外科	30	196	9.0	12.0
3	龚连生	中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科中心	78	1124	17.0	31.0
4	王宪伟	中南大学湘雅医院普通外科	29	120	5.0	9.0
5	潘一峰	中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科中心	78	436	9.0	17.0
6	王渊璟	中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科中心	4	18	2.0	4.0
7	刘勤	中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科中心	21	129	8.0	10.0