新疆水源性隐孢子虫的检测

• 作者: 孟静 赵媛媛 阿斯亚·拜山伯
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 水源性 隐孢子虫 巢式PCR PCR-RFLP
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 42-44,28
• 页数: 4页
• 分类号: R382.3
• 语种: 中文

摘要

目的 检测新疆15个城市自来水和河水隐孢子虫污染情况. 方法 采集水样,分别应用改良美国环保局(EPA)1622法及巢式PCR(nested-PCR)方法进行检测.1)改良EPA1622法:水样经微孔滤膜抽滤、淘洗,磁抗体分离法分离纯化后免疫荧光染色鉴定.2)Nested-PCR法:用试剂盒提取纯化的隐孢子虫卵囊基因组DNA,针对隐孢子虫小亚单位核糖体RNA(18SrRNA)部分基因,依据文献设计并合成引物,用巢式PCR扩增,产物纯化后经SspI及VspI单酶切,并进行RFLP分析. 结果 2种方法检测新疆15个地区的自来水隐孢子虫卵囊均为阴性,改良EPA1622法检测乌鲁木齐市、昌吉市、伊宁市和吐鲁番市的河水隐孢子虫卵囊阳性.巢式PCR检测乌鲁木齐市和伊宁市水样,均扩增出约830 bp的特异片段,RFLP初步鉴定为小鼠隐孢子虫基因;昌吉市和吐鲁番市河水水样PCR检测阴性. 结论 新疆乌鲁木齐市、伊宁市河水检出隐孢子虫,初步鉴定为小鼠隐孢子虫.而当地的饮用水未受污染.