大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的原核表达、纯化及其黏膜免疫佐剂作用

• 作者: 凌媛 单璞 崔文禹 徐静 李媛媛 李计来
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位 免疫,黏膜 佐剂,免疫
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1417-1420
• 分类号: Q786|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达、纯化大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(Heat-labile enterotoxin B subunit,LTB),并评价其黏膜免疫的佐剂作用.方法 从产毒素大肠杆菌44815菌株中扩增出LTB基因,克隆至质粒pET-32a(+)中,构建重组原核表达质粒pET-32a(+)-LTB,转化大肠杆菌BL21( DE3 )pLysS,IPTG诱导表达,表达的LTB经纯化后进行神经节苷脂GM1结合活性及黏膜免疫佐剂活性鉴定.结果 重组表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确；重组LTB主要为可溶性表达,表达量约占菌体总蛋白的15％；纯化的LTB纯度可达95％以上,可与兔抗CTB血清发生特异性反应,且具有GM1结合活性及良好的黏膜免疫佐剂活性.结论 在大肠杆菌中成功表达了重组LTB蛋白,纯化的LTB具有良好的黏膜免疫佐剂活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐静	北京生物制品研究所第三研究室	44	107	5.0	8.0
2	李媛媛	北京生物制品研究所第三研究室	14	15	2.0	3.0
3	凌媛	北京生物制品研究所第三研究室	11	16	3.0	3.0
4	李计来	北京生物制品研究所第三研究室	10	12	3.0	3.0
5	崔文禹	北京生物制品研究所第三研究室	8	21	3.0	4.0
6	单璞	北京生物制品研究所第三研究室	8	15	2.0	3.0