HBV(ayw)转基因小鼠HBV复制中间体的检测

• 作者: 孔祥平 尤玉琴 张锋 易学瑞 苏蔚 袁有成 陈文吟 陈阳述
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠,转基因 肝炎病毒,乙型 双杂交系统技术
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: HBV转基因小鼠研究专栏
• 页码范围: 959-961
• 分类号: R512.62
• 语种: 中文

摘要

目的 建立稳定、高灵敏度化学发光Southern blotting检测系统,检测HBV(ayw)转基因小鼠肝脏及其他组织的HBV复制水平.方法 采用地高辛标记HBV探针,利用pTHBV1047质粒检测杂交系统的灵敏度及重复性；提取第27代HBV(ayw)转基因小鼠肝、肾、脾和肌肉组织总DNA,经HindⅢ酶切后电泳、转膜,利用高灵敏度化学发光杂交Southern blotting检测各组织中HBV复制中间体的水平.结果 地高辛标记的化学发光检测系统灵敏度达0.1pg,且杂交系统稳定可靠.HBV(ayw)转基因小鼠基因组DNA中检测到整合的外源HBV DNA,但低于HepG2.2.15细胞的HBV复制水平.肝、肾、脾和肌肉组织中都有HBV复制中间体存在,以肝组织中含量最高.结论第27代HBV(ayw)转基因小鼠染色体含有稳定的HBV基因整合,为复制型HBV转基因小鼠.