YMDD突变株HBV转基因小鼠的制备及检测

• 作者: 刘光泽 周军辉 孔祥平 尤玉琴 李秀梅 杨富强 陈媚娟 陈阳述
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 小鼠,转基因 显微注射
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: HBV转基因小鼠研究专栏
• 页码范围: 962-963,966
• 分类号: R512.62
• 语种: 中文

摘要

目的 建立YMDD耐药突变株HBV转基因小鼠,为乙肝防治研究提供转基因动物模型.方法 采用受精卵显微注射法,将带有YMDD突变的对拉米夫定有耐药性的1.3拷贝HBV基因注入FVB/N单细胞受精卵的原核内,制备YMDD耐药突变株HBV转基因小鼠.采用PCR检测外源基因的整合和传代情况,采用ELISA和免疫组化等方法 检测HBsAg在肝、肾中的复制和表达情况.结果 注射受精卵3401枚,产269只F0代仔鼠,PCR阳性33只,外源基因的整合率12.3%.9只转基因鼠血清HBVDNA弱阳性,拷贝数低于103拷贝/ml;免疫组化结果 显示肝组织和肾组织均有HBsAg表达,且肾组织中的表达强于肝组织.经传代产下47只F1代转基因鼠,目的基因FCR阳性率为27.6%,且肝组织和肾组织中HBsAg均有表达,分布特性与F0代一致.结论成功制备出体内有复制表达而且可以传代YMDD耐药突变株HBV的转基因小鼠.