铜绿假单胞菌重组Bb-OprF疫苗构建及鉴定

• 作者: 朱佑明 李文桂 罗永艾
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 铜绿假单胞菌 OprF 疫苗
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 303-306
• 分类号: R378.99
• 字数: 2899字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.04.009

摘要

目的 构建和鉴定铜绿假单胞菌重组双歧杆菌(rBb)-OprF疫苗.方法 以铜绿假单胞菌PAOl标准株提取总RNA为模板,自行设计引物,RT-PCR扩增获得OprF抗原编码基因,经酶切、连接定向克隆入大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-OprF.转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,抽提质粒行酶切电泳和测序验证后,电穿孔转化到Bb中,构建铜绿假单胞菌rBb-OprF疫苗,抽提质粒进行PCR扩增鉴定.结果 RT-PCR扩增出1 016bp的OprF编码基因;重组质粒经双酶切鉴定,切出4 947bp的载体片段和10 16bp的目的基因片段;以rBb抽提质粒为模板进行PCR扩增可得到1 016bp的oprF基因片段.结论 成功构建了铜绿假单胞菌rBb-OprF疫苗,为该疫苗的进一步研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李文桂	重庆医科大学附属第一医院呼吸内科	313	1230	16.0	20.0
2	朱佑明	重庆医科大学附属第一医院呼吸内科	47	304	10.0	14.0
4	罗永艾	重庆医科大学附属第一医院呼吸内科	178	1476	20.0	30.0