小麦TaDREB6转录因子互作蛋白的筛选

• 作者: 于卓 侯建华 孙海桃 徐兆师 李连城 赵月 陈明 马有志
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 普通小麦 酵母双杂交 DREB 互作蛋白 抗逆机制
• 年，卷（期）: 2011,（22）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 4740-4747
• 分类号: S512.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.22.023

摘要

[目的]利用酵母双杂交技术从小麦cDNA文库中筛选TaDREB6互作蛋白,进一步研究DREB介导的小麦抗逆机制.[方法]以小麦的cDNA为模板扩增得到TaDREB6,构建小麦cDNA文库和pGBKT7-TaDREB6诱饵载体,将诱饵载体pGBKT7-TaDREB6以及pGADT7和cDNA文库混匀转入AH109酵母感受态细胞,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp营养缺陷型培养基上,30℃培养3-5 d,挑取平板上直径大于2mm的菌落,进行显蓝筛选.[结果]对筛选到的102个候选阳性克隆进行测序,在NCBI上进行BLAST比对分析,获得与能量代谢、抗逆和防御、转运、转录和翻译、信号转导以及生长发育等相关的候选蛋白.[结论]筛选得到候选蛋白的功能预测表明TaDREB6可能参与了多条信号转导途径,在抗逆境调控中具有重要作用.