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摘要:
人IL-17A和IL-17F具有很高的同源性,在炎症性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤中都发挥着重要的作用,是当前研究的热点.应用原核表达系统在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了人IL-17A和IL-17F;经培养条件的优化,未发现可溶性目的蛋白的表达,免疫印记分析显示,重组蛋白位于包涵体中;对包涵体进行洗涤、凝胶过滤层析纯化和柱上复性,获得重折叠的可溶性蛋白;随后用SDS-PAGE对蛋白样品进行了纯度分析、采用免疫印记和质谱的方法鉴定蛋白产物成分、用ME3T3-E1和RAW264.7两个细胞株对IL-17A、IL-17F的生物学活性进行测定.结果显示,柱上复性的方法制备的谊重组蛋白具有较高的纯度和活性.建立的重组人IL-17A和IL-17F的制备方法可为相关研究中细胞因子的大量应用提供参考.
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内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 重组人IL-17A和IL-17F的制备方法及活性测定
来源期刊 生物技术通报 学科 生物学
关键词 IL-17A IL-17F 蛋白纯化 柱上复性 活性测定
年,卷(期) 2011,(4) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 137-142
页数 分类号 Q78
字数 4958字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李慎涛 首都医科大学免疫学系 29 94 5.0 8.0
2 赵文明 首都医科大学免疫学系 45 291 11.0 15.0
3 刘振龙 首都医科大学免疫学系 19 121 6.0 10.0
4 贾军会 首都医科大学免疫学系 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
IL-17A
IL-17F
蛋白纯化
柱上复性
活性测定
研究起点
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18-92
1985
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