b-Boule基因5'调控序列的克隆与睾丸组织DMR甲基化分析

• 作者: 于莎莉 徐洪涛 朱翔 李明桂 李隐侠 李齐发 潘增祥 谢庄 赵兴波
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 牦牛 犏牛 b-Boule 基因 5'调控序列 甲基化
• 年，卷（期）: 2011,（18）
• 所属期刊栏目: 畜牧、资源昆虫
• 页码范围: 3859-3867
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.18.017

摘要

[目的]研究b-Boule基因5’调控序列的序列特征,以及牦牛、黄牛与犏牛睾丸组织b-Boule基因DMR 甲基化状态的差异,为揭示b-Boule基因的表达调控和犏牛雄性不育的表观遗传机制提供依据.[方法]采用PCR 扩增和克隆测序技术获得牦牛b-Boule基因5’调控序列,利用生物信息学方法分析b-Boule基因5’调控序列的序列特征,采用亚硫酸氢钠测序法检测牦牛、黄牛与犏牛睾丸组织中b-Boule基因DMR的甲基化状态.[结果]b-Boule 基因5'调控序列长度为1 352 bp,核心启动子区含有SP1等甲基化敏感位点,5’端存在一个CpG岛.犏牛b-Boule 基因DMR的甲基化水平(1 7.78％)高于牦牛(7,50％)和黄牛(6.94％)(P＜0.01),特别是CpG位点33-35的甲基化水平差异更明显.[结论]犏牛b-Boule基因DMR的甲基化水平高于牦牛和黄牛,结合前期mRNA表达水平和组织学观察结果,认为DMR甲基化在b-Boule基因的表达调控中发挥关键作用,犏牛b-Boule基因可能是通过DMR 区的高甲基化抑制其mRNA表达来阻滞精子发生减数分裂过程.