东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST的表达、纯化及抑菌活性分析

• 作者: 张晶钰 徐义刚 柴龙会 肖向红 郭娜
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 东北林蛙 抗菌肽 毕赤酵母 抑菌活性
• 年，卷（期）: 2011,（15）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 3246-3251
• 分类号: S917.4
• 语种: 中文

摘要

[目的]利用毕赤酵母菌真核表达系统重组表达东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST,分析评价dybowskin-1ST的抑菌活性.[方法]采用TRIzol法提取蛙皮总RNA,经RT-PCR扩增获得抗菌肽dybowskin-1ST基因,将目的基因克隆到毕赤酵母菌分泌型表达质粒pPIC9K中,得到重组质粒pPIC9K-1ST.经电转化将pPIC9K-1ST转入到毕赤酵母菌GS115中,获得高效表达 dybowskin-1ST的重组菌株.以甲醇诱导重组菌株,上清液经SDS-PAGE检测表明有目的蛋白dybowskin-1ST分泌表达.目的蛋白经Ni-agarose色谱柱分离纯化后,对大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、肠炎沙门氏菌和蜡状芽孢杆菌进行抑菌活性分析.[结果]成功构建了东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST的毕赤酵母真核表达系统,且dybowskin-1ST对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有良好的抑菌效果.[结论]东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST具有良好的广谱抗菌活性和潜在的研发价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐义刚	黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心	33	254	9.0	13.0