TLR4/MyD88信号通路在树突状细胞-肾癌786-0细胞株融合瘤苗中的作用

• 作者: 刘富 胡自力 谭小军
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: TOLL样受体4 树突状细胞 肾癌 融合瘤苗 核转录因子 半定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2011,（15）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1576-1581
• 分类号: R73-35|R730.23|R737-11
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨TOLL样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)信号通路在树突状细胞(dentric cell,DC)-肾癌786-0细胞融合瘤苗中的变化及作用.方法 用正常人外周血诱导不成熟的树突状细胞(immature dentric cell,imDC),利用聚乙二醇法(PEG)制成imDC-肾癌-786-0细胞融合瘤苗；用透射电镜观察imDC融合前后变化情况；RT-PCR检测单纯imDC组,肾癌786-0细胞组,imDC-肾癌-786-0融合瘤苗组在6、12、24、48 h中TLR4及MyD88 mRNA变化情况；用激光共聚焦检测imDC中核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)在融合前后转位情况；流式细胞仪检测imDC在融合前后CD86、HLA-DR变化；噻唑盐(MTT)法检测各组体外刺激T淋巴细胞的增殖能力及刺激的细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的杀瘤活性.结果 透射电镜显示融合细胞中imDC转变为mDC;TLR4及MyD88 mRNA在肾癌中不表达,在单纯imDC中呈低表达(TLR4/β-actin灰度比值0.40±0.03,MyD88/GAPDH灰度比值0.33±0.03),在融合瘤苗组中6h表达最强(TLR4/β-a1ctin灰度比值0.73±0.18,MyD88/GAPDH灰度比值为0.45±0.18),明显强于各组(P＜0.05),此后在融合细胞中逐渐减弱,48 h基本不表达；激光共聚焦显示NF-κB在融合前位于imDC细胞质,融合后转移至细胞核；流式细胞仪提示融合瘤苗HLA-DR、CD86表达分别为81%、80%,明显高于imDC组(63%、59%)及肾癌细胞组(P ＜0.05)；MTT法示融合疫苗在体外刺激T淋巴细胞增殖能力[D(570)值(1.95±0.22)]强于imDC组(1.31±0.35)及肾癌786-0组(1.28±0.33) (P＜0.05),并且其诱导产生的CTLs对自体肾癌细胞具有显著的杀伤活性.结论TLR4/MyD88-NF-κB信号通路在imDC与肾癌786-0细胞融合过程中促使树突状细胞成熟发挥了非常重要的作用,并且此信号通路能促使树突状细胞功能发生转变.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡自力	重庆医科大学附属第二医院泌尿外科	81	312	9.0	13.0
2	刘富	重庆医科大学附属第二医院泌尿外科	2	2	1.0	1.0
3	谭小军	重庆医科大学附属第二医院泌尿外科	2	11	2.0	2.0