高分辨熔解曲线法检测哈萨克族食管癌患者癌组织中FHIT、 CDKN2A启动子区甲基化水平及临床意义

• 作者: 刘玲 吴军 周搏 姜孝芳 庞作良 李卉 李惠武 李秀梅 王洪江 陈艳 马莉莉
• 来源期刊: 科技导报
• 学科: 医学
• 关键词: 食管癌 甲基化 高分辨熔解曲线 FHIT CDKN2A
• 年，卷（期）: 2011,（31）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 59-63
• 分类号: R735.1
• 字数: 3826字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3981/j.issn.1000-7857.2011.31.009

摘要

建立高分辨熔解曲线法(HRM)定量检测哈萨克族食管癌患者癌组织中FHIT、CDKN2A甲基化水平,并分析甲基化水平与食管癌病理参数的相关性.选取30例食管癌癌患者癌组织及30例癌旁组织,提取DNA,进行甲基化修饰.将标准品DNA(甲基化DNA与非甲基化DNA相互的掺入)稀释成0,5％,25％,50％,75％,100％甲基化DNA,并进行重复性和灵敏性评价.应用HRM定量检测癌组织及癌旁组织甲基化水平,探讨FHIT、CDKN2A基因启动子区甲基化水平与食管癌发生发展的关系.100％,80％,50％,30％,10％,0甲基化标准品的高分辨率熔解曲线从右向左依次排列,待测基因在标准曲线上的位置即表示其甲基化程度.HRM最低检测限为1％,明显高于MSP结果最低检测限10％.在30例食管癌癌患者癌组织中,检测出存在FHIT甲基化的为36.7％.其中8例甲基化程度为0-5％,3例为5％- 10％.CDKN2A甲基化的为100％,其中7例甲基化程度为0-5％,11例为5％- 10％,12例为10％-25％.与正常组织比较,抑癌基因的甲基化与癌症的发生无明显相关性.进一步讨论甲基化与食管癌的病理级别以及甲基化与分化程度的关系,二者均无相关性.通过HRM技术成功建立了定量检测哈萨克族食管癌组织中FHIT、CDKN2A甲基化程度的方法,FHIT、CDKN2A基因启动子甲基化与哈萨克族食管癌的发生发展无明显相关性,但多个抑癌基因的甲基化有望成为其早期发生发展的分子指标.