变性高效液相色谱法检测鲍曼不动杆菌喹诺酮耐药基因突变

• 作者: 伍严安 吴旋
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鲍氏不动杆菌 喹诺酮类 色谱法,高效液相 DNA促旋酶 DNA拓扑异构酶Ⅳ 突变
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 448-450
• 分类号: R446.5
• 字数: 2898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2011.04.008

摘要

目的 通过运用变性高效液相色谱(DHPLC),研究鲍曼不动杆菌耐药表型与其染色体上gyrA和parC基因突变的关系.方法 采用微量肉汤稀释法测定左氧氟沙星和加替沙星对90株临床分离鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC);采用基因外序列进行同源性分析,PCR扩增鲍曼不动杆菌的gyrA和parC基因,对PCR产物进行DHPLC检测及DNA测序.结果 90株鲍曼不动杆菌中,对左氧氟沙星和加替沙星耐药率分别为63.3%和60.0%;同源性分析可分成9种基因型,90株扩增出了343 bp的gyrA基因和327bp的parC基因产物.9种基因型中,3种表型耐药的基因型PCR产物经DHPLC检测均出现异常双峰或者多峰.测序证实gyrA基因存在83位Ser→Leu突变,parC基因在80位同样出现Ser →Leu突变,同时parC基因还存在多个位点的同义突变;敏感株运用DHPLC检测只出现单峰,测序未发现突变.结论 运用DHPLC检测可以快速发现细菌耐药基因的突变,鲍曼不动杆菌对喹诺酮类药物的耐药与gyrA和parC基因的高频突变相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	伍严安		60	193	7.0	11.0
2	吴旋	福建医科大学省立临床医学院	2	1	1.0	1.0