SiRNA干扰靶向抑制酪氨酸蛋白激酶Lck对哮喘小鼠T细胞功能的影响

• 作者: 季巧英 宋东莉 方双燕 杨琼芳 舒彩敏 郑永华
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA,小分子干扰 淋巴细胞特异蛋白质酪氨酸激酶p56(Lck) 哮喘/免疫学 细胞因子类/代谢
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1323-1326
• 分类号: R1
• 字数: 3917字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2011.10.008

摘要

目的 通过siRNA技术靶向抑制哮喘小鼠T细胞非受体酪氨酸蛋白激酶Lck的基因表达,研究Lck特异性siRNA对哮喘小鼠T细胞功能的影响.方法 化学法合成小鼠T细胞Lck基因21 - 23 bp的RNA片段,以INTERFERinTMsiRNA Transfection Reagent作为转染试剂,将合成的siRNA片段转染哮喘小鼠脾脏来源的T细胞,作用48h后再与哮喘小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)混合反应48 h,收集细胞上清液,ELISA法检测细胞因子IL-4 、IL-13、IL-2、INF-γ; Western Blot法检测T细胞kk蛋白的含量,判断其表达是否被沉默.结果 siRNA干扰组T细胞中几乎检测不到Lck蛋白的表达,且其细胞上清液中IL-4、IL-13的水平(10.19±1.66、12.34±0.79)较非siRNA干扰组(28.06±2.88、27.87±1.61)及对照组(22.07±2.51、20.47±2.37)明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 特定的21 -23 bp的RNA片段能够以siRNA干扰的方式有效的抑制特定基因的表达,Lck特异性siRNA可以阻断哮喘小鼠T细胞的激活和分化,减少哮喘炎症因子的释放.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋东莉	复旦大学附属中山医院实验研究中心	6	11	1.0	3.0
2	郑永华	复旦大学附属中山医院实验研究中心	3	4	1.0	1.0