高质量的滇重楼胚总RNA的提取方法研究及LD_PCR检测

• 作者: 孙鹏 李先恩 祁建军 秦民坚 郑娜
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 滇重楼 多糖 蛋白 总RNA 提取
• 年，卷（期）: 2011,（13）
• 所属期刊栏目: 园艺-研究报告
• 页码范围: 126-129
• 分类号: Q75
• 字数: 3970字
• 语种: 中文

摘要

探讨一种有效提取滇重楼胚总RNA方法.以滇重楼的胚为试验材料,将常规的SDS提取植物总RNA的方法做了改进:在RNA提取缓冲液中加入SDS的步骤上进行了调整,结合异丙醇和醋酸钠室温沉淀能更有效的去除多糖;醋酸-醋酸钠的缓冲体系维持提取液较低pH值,有效抑制RNA酶活性;将SDS的浓度提高到5%,并结合酸酚/氯仿抽提去除蛋白质污染,首次建立了一种简单有效的从滇重楼胚中提取总RNA的方法.该方法所提RNA的A260/A230均大于2.0,A260/A280的值为1.8～2.0,电泳条带清晰,RNA完整性好.利用该方法提取的滇重楼幼胚总RNA具有很高的纯度和质量,可以满足后续LD-PCR及文库构建等分子生物学研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦民坚	中国药科大学中药学院	182	2990	28.0	46.0
2	郑娜	中国药科大学中药学院	1	1	1.0	1.0