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核转染对成体骨髓源性干细胞的影响
核转染对成体骨髓源性干细胞的影响
作者:
曹亮
李震
毛颖玉
沈晓涛
蔡冬青
郑馨
陈斯韵
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
成体骨髓呈克隆样干细胞
核转染
增殖
分化
示踪
摘要:
背景:成体骨髓源性干细胞是实施细胞治疗的重要细胞来源.对成体骨髓源性干细胞的示踪,是研究其移行、分化的规律与机制并进一步阐明再生潜能、疗效的关键.目的:探讨经转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,在细胞表型、增殖能力、心肌分化潜能是否存在的影响.方法:应用核转染技术利用U-23程序将编码maxGFP报告基因的载体对成体骨髓呈克隆样干细胞进行转染,应用MTT法对核转染前后的生长曲线进行测定,使用3 μmol/L 5-氮胞苷对核转染前后成体骨髓呈克隆样干细胞进行向心肌分化诱导,并利用RT-PCR对向心肌分化的特异性标记物GATA4与MLC-2v的表达进行测定.使用成年SD大鼠心肌梗死左前降支结扎模型,对使用经maxGFP转染的成体骨髓呈克隆样干细胞施心内注射并于注射后的第2天和第7天对经注射心脏行冰冻切片并观察maxGFP在体内的表达情况.结果与结论:经核转染24 h后,第47代及第119代成体骨髓呈克隆样干细胞的转染率为49.4%和43.1%,转染后5 h,开始出现呈绿色荧光阳性的细胞,经核转染后仍能保持小圆球形、可贴壁、呈克隆样生长.MTT检测结果显示:核转染前后第47代及第119代均具有相似的生长曲线.核转染前第47代及119代细胞平均群体倍增时间分别为8.57,10.28 h;核转染后分别为9.42,10.42 h,各代前后比较差异无显著性意义(P=0.551,P=0.774).RT-PCR检测结果显示:核转染前5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强;核转染后5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强,上述2个向心肌分化指标于转染前后变化并不明显.体内实验结果:心内注射经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,第2天及第7天可在经注射心肌中发现有少量绿色荧光阳性的细胞.提示,核转染可快速地将外源基因导入细胞,经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞仍能保持其细胞形态、增殖能力及向心肌分化潜能,然而,经maxGFP基因核转染的成体骨髓呈克隆样干细胞,移植入心肌后只有少数细胞能表达经转染基因.
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文献信息
篇名
核转染对成体骨髓源性干细胞的影响
来源期刊
中国组织工程研究与临床康复
学科
医学
关键词
成体骨髓呈克隆样干细胞
核转染
增殖
分化
示踪
年,卷(期)
2011,(1)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
1-6
页数
分类号
R394.2
字数
6498字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1673-8225.2011.01.001
五维指标
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节点文献
成体骨髓呈克隆样干细胞
核转染
增殖
分化
示踪
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国组织工程研究
主办单位:
中国康复医学会
《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
出版周期:
旬刊
ISSN:
2095-4344
CN:
21-1581/R
开本:
大16开
出版地:
沈阳浑南新区10002信箱
邮发代号:
8-584
创刊时间:
1997
语种:
chi
出版文献量(篇)
55677
总下载数(次)
80
总被引数(次)
337465
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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