重组人血清白蛋白突变体干扰素2b融合蛋白的纯化

• 作者: 张国华 汤火龙 肖建国 蔡煜 阮振兴 陈慧敏
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 人血清白蛋白突变体干扰素α2b融合蛋白 毕赤酵母 高密度发酵 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 105-109
• 页数: 5页
• 分类号: Q51
• 语种: 中文

摘要

在成功构建人血清白蛋白突变体干扰素α2h融合蛋白(rmHSA-IFN-α2b)毕赤酵母工程菌株PicZαA/rmHSA -IFN -α2 b/X33的基础上,建立了发酵分泌表达rmHSA-IFN-α2b的纯化工艺.对工程菌进行9L罐高密度发酵后,离心收集发酵液上清,rmHSA-IFN-α2b的表达量为421 mg/L.对发酵液上清,依次进行3步纯化.第一步采用SP sepharose FF除去大部分色素和部分杂蛋白.第二步采用Blue sepharose FF根据亲和作用原理除去部分杂质.第三步采用Q sepharose FF除去溶剂和其他杂质以及类毒素.最终得到高纯度、有活性的rmHSA-IFN-α2b.通过HPLC检测和SDS-PAGE检测,最终产品的纯度都大于95％；通过活性检测,rmHSA-IFN-α2b的比活为1.5×106 IU/mg.纯化总收率为25.3％.连续重复纯化6批,结果稳定.该工艺简单稳定,容易放大,适合规模化生产.简单高效纯化工艺的建立,为rmHSA-IFN-α2b后续研究奠定了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖建国		2	1	1.0	1.0
2	阮振兴		2	1	1.0	1.0
3	汤火龙		1	0	0.0	0.0
4	蔡煜		1	0	0.0	0.0
5	陈慧敏		1	0	0.0	0.0
6	张国华		1	0	0.0	0.0