布鲁氏菌S2株菌壳的制备研究

• 作者: 何永聚 冯书章 刘军 刘爽 周博 孙洋 祝令伟 纪雪
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 布鲁氏菌 菌壳 裂解质粒
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 679-682
• 分类号: R378.5
• 字数: 2964字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2012.07.007

摘要

目的 利用温控表达调节系统在布鲁氏菌中诱导表达裂解基因E,制备布鲁氏菌S2株菌壳,监测其裂解效率,并观察茵壳形态.方法 从pBV220::E中PCR扩增温控裂解盒和裂解基因E融合片段,克隆至pBBR1 MCS-2载体上,构建重组裂解质粒pBBRl MCS-E,并将其电转化至布鲁氏菌S2株,构建重组菌S2(pBBRl MCS-E).通过28℃至42℃升温诱导培养制备布鲁氏菌菌壳,绘制生长曲线和裂解曲线,计算裂解率,并电镜观察菌壳形态.结果 成功构建了重组裂解质粒pB-BRlMCS-E并制备了布鲁氏菌菌壳.绘制出了布鲁氏菌裂解曲线,布鲁氏菌菌壳的裂解率达99.99％,经高渗溶液冻融后可完全消除其中残存的活菌.电镜观察表明布鲁氏菌菌壳保持有细胞的基本形态,但由于细胞内容物外流而使细胞发生变形和皱缩.结论 本研究成功制备出了布鲁氏菌菌壳,为进一步研究布鲁氏菌菌壳的特性奠定了基础.