稳定转染小鼠IL-17全长基因的乳腺癌细胞株的建立及基因转染对4T1细胞的影响

• 作者: 单保恩 姚智燕 张海谱 杨丽娟 胡洁 赵莎
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素17 转染 乳腺肿瘤
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 603-607
• 分类号: R737.9
• 字数: 4974字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2012.08.013

摘要

目的 建立稳定转染小鼠IL-17基因全长的小鼠乳腺癌4T1细胞株,并进行鉴定.方法 脂质体法将携带小鼠IL-17基因全长的真核表达载体pcDNA3.1转染小鼠乳腺癌细胞4TI,经G418筛选出稳定表达IL-17的细胞株;镜下观察细胞形态,RT-PCR法、Western印迹和激光共聚焦法检测目的 基因和蛋白的表达;收集转染和未转染IL-17的4T1细胞的培养上清,分别与巨噬细胞RAW264.7共培养,ELISA法检测RAW264.7细胞培养上清中IL-6水平;MTS法检测细胞的增殖情况,流式细胞技术检测细胞周期、凋亡以及细胞表面MHC I、MHCⅡ、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)等分子表达.结果 获得1株稳定表达IL-17的4T1细胞,而且其培养上清可刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7产生IL-6,证明该细胞可表达功能性IL-17.结论 成功建立了稳定转染IL-17基因的小鼠乳腺癌细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单保恩	河北医科大学第四医院科研中心	390	3712	26.0	43.0
2	胡洁	河北医科大学基础医学院免疫学教研室	50	191	8.0	10.0
3	杨丽娟	河北医科大学基础医学院免疫学教研室	38	217	6.0	13.0
4	姚智燕	河北医科大学基础医学院免疫学教研室	19	33	3.0	4.0
5	张海谱	白求恩国际和平医院检验实验中心	28	61	4.0	6.0
6	赵莎	河北医科大学第四医院检验科	3	1	1.0	1.0