Junctophilin 1 在小鼠胚胎干细胞定向分化心肌细胞及大鼠胚胎心肌发生中的表征

• 作者: 吴博文 周立民 张维晨 朱丹雁 梁星光 楼宜嘉
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: Junctophilin 1 胚胎干细胞 连接蛋白类 心肌/生长和发育 心肌/细胞学 细胞分化 定向分化 大鼠胚胎 心肌发生
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 359-365
• 分类号: R965
• 字数: 4242字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2012.04.002

摘要

目的:评价膜连接蛋白Junctophilin 1 (JP1)亚型在哺乳动物心肌发生过程中,基因转录和蛋白表达特征,为心肌发育生物学及心脏再生医学相关生命现象本质提供实验依据.方法:小鼠胚胎于( embryonic stem,ES)细胞相继制成单细胞悬液和悬滴,收集拟胚体转至培养皿中悬浮分化培养.每隔2d收集细胞供分子生物学评价,并于心肌分化成熟期(第17天),免疫荧光成像原位检测JP1与心肌小节蛋白α-Actinin和Troponin-T是否呈共表达,流式细胞术定量确认JP1阳染率.另以大鼠胎心为研究对象,大鼠受精后第14天起,每隔2d取胎心直至分娩新生鼠,供RT-PCR和免疫印迹实验用.结果:ES细胞分化过程中,JP1在基因转录层面全程表达,至第11天达高峰.蛋白层面呈一过性表达,在第9天达高峰,此后迅速下降,至分化培养第15天消失,分化成熟期未见表达.大鼠胎心表达趋势与ES细胞分化过程基本一致,但JP1蛋白表达持续在出生后.在分化终端,流式细胞术显示JP2和肌小节蛋白双染率达16.59％,而未见JP1阳染细胞.结论:JP1基因在小鼠ES细胞定向分化心肌细胞全程均有转录,但JP1仅在分化早期有一过性表达.大鼠胎心JP1表达趋势与ES细胞分化过程基本相一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱丹雁	浙江大学药学院心脑血管与肝脏药理研究室	20	124	5.0	10.0
2	楼宜嘉	浙江大学药学院心脑血管与肝脏药理研究室	60	567	13.0	22.0
3	梁星光	浙江大学药学院心脑血管与肝脏药理研究室	6	31	3.0	5.0
7	周立民	浙江大学药学院心脑血管与肝脏药理研究室	2	5	2.0	2.0
8	吴博文	浙江大学药学院心脑血管与肝脏药理研究室	2	3	1.0	1.0