大鼠下颌下腺细胞与柞蚕丝素蛋白膜体外复合培养的实验研究

• 作者: 刘丽萍 刘焱 易新 李波 谭学新
• 来源期刊: 上海口腔医学
• 学科: 医学
• 关键词: 组织工程 下颌下腺 柞蚕丝素蛋白 桑蚕丝索蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 370-377
• 分类号: R782
• 语种: 中文

摘要

目的:通过大鼠下颌下腺细胞(rat submandibular gland cells,RSMGs)与柞蚕丝素蛋白(antheraea pernyi silk fibroin,ApSF)膜的体外共培养,探讨RSMGs在支架上的形态特征、黏附、增殖及分泌功能.方法:将柞蚕丝素蛋白膜、桑蚕丝素蛋白(bombyx mori silk fibroin,BmSF)膜分别接种SD大鼠的RSMGs进行共培养,并以24孔培养板单独培养的RSMGs作为阴性对照组.免疫细胞化学抗角蛋白抗体(cytokratin 8,CK8)、淀粉酶抗体(amylase)染色鉴定细胞来源:扫描电镜、荧光显微镜观察细胞支架复合生长情况;检测细胞在支架上的黏附率;MTT比色法检测材料上细胞的增殖能力;Amano法测定上清液中淀粉酶含量,检测细胞支架共培养后下颌下腺细胞的功能.采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:免疫细胞化学染色观察共培养后的细胞,上皮细胞特异性抗体CK8染色阳性,腺泡上皮细胞特异性抗体Amylase染色阳性.扫描电镜可见,共培养后ApSF膜上细胞增殖活跃,表面呈现出微绒毛等超微结构,并向支架材料伸出伪足.荧光显微镜下可见,随着共培养时间的延长,支架上锚定的种子细胞数量增多,形态规则.2组支架接种细胞1h后,RSMGs开始附着于支架上且黏附率差异不显著(P＞0.05);4～12 h2组黏附率逐渐增大,ApSF组较BmSF组更显著(P＜0.05);24h时,95％细胞黏附于2种材料上,2组差异不显著(P＞0.05).MTT提示,RSMGs与ApSF复合培养3、5 d后增殖迅速,第7天时达到峰值;ApSF组的细胞在第3、5和7天增殖速度与BmSF组差异显著(P＜0.05),2组细胞增殖均与阴性对照组差异显著(P＜0.05).Amano法提示,随着接种后培养时间的延长,2组淀粉酶含量均有不同程度的增加;ApSF组在第3、5、7天时唾液淀粉酶浓度与BmSF组相比有显著差异(P＜0.05),2组酶浓度均与阴性对照组差异显著(P＜0.05).结论:RSMGs与ApSF复合培养后,可保持细胞表型、增殖分化能力及分泌功能.ApSF对于RSMGs具有较好的细胞相容性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李波	中国医科大学口腔医学院口腔解剖生理学教研室	126	286	8.0	11.0
2	刘丽萍	内蒙古包头医学院第一附属医院肾内科	18	25	3.0	4.0
3	谭学新	中国医科大学口腔医学院口腔颌面外科	61	328	10.0	14.0
7	易新	中国医科大学口腔医学院口腔解剖生理学教研室	15	24	3.0	4.0
8	刘焱	中国医科大学口腔医学院口腔解剖生理学教研室	3	3	1.0	1.0