重组腺病毒载体负载树突状细胞诱导乙肝病毒特异性细胞毒性T 淋巴细胞

• 作者: 周向军 姜维 张克 李溢柔 李进 陶然 马世武
• 来源期刊: 中华细胞与干细胞杂志（电子版）
• 关键词: 树突细胞 腺病毒 肝炎核心抗原,乙型 T淋巴细胞,细胞毒性
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 261-268
• 页数: 8页
• 字数: 5219字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2012.04.006

摘要

目的 本研究利用重组腺病毒载体将乙肝病毒基因导入树突状细胞(DC)内表达成内源性蛋白,探索DC 体外抗原负载并诱导乙肝病毒(HBV)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的有效方法.方法 分离外周血单个核细胞(PBMC)并诱导成DC.用HFP3 肽辅助腺病毒载体进行抗原负载,检测DC 细胞内乙肝核心抗原基因的表达,比较成熟前后DC 的表面分子,研究DC 诱导的乙肝病毒核心抗原(HBcAg)特异性CTL 的增殖.应用统计软件SPSS17.0 进行统计分析,以P <0.05 为差异有统计学意义.结果 重组腺病毒CHB3 感染的DC 能有效表达HBcAg 蛋白.HFP3 辅助感染能显著提高感染效率达3 ~ 10 倍.腺病毒载体负载的DC 表面CD80、CD86、CCR7 的表达有所上调,但差异无统计学意义(平均荧光强度CHB3/iDC:CD80,46.2 ± 14.6 / 29.9 ± 7.9,P = 0.209 ;CD86,142.0± 12.9 / 113.3 ± 6.5,P = 0.430 ;CCR7,49.3 ± 3.0 / 36.4 ± 4.6,P = 0.054).Cocktail 促成熟后,CD80、CD83、CD86、CCR7 显著上调(平均荧光强度Cocktail-CHB3/iDC:CD80,97.1± 8.1 / 29.9 ± 7.9,P = 0.0019 ;CD83,75.4 ± 8.4 / 26.8 ± 1.5,P = 0.017 ;CD86,176.2 ± 14.8 /113.3 ± 6.5,P = 0.021 ;CCR7,75.3 ± 3.4 / 36.4 ± 4.6,P = 0.0016),HLA-DR 分子维持高表达.CHB3 负载的DC 与自体T 细胞共培养,可检测到HBcAg 特异性CTL 比例明显增高(1 例由0.25 ﹪增至1.98 ﹪,另1 例由0.19 ﹪增至1.37 ﹪).结论 在优化的条件下,重组腺病毒载体CHB3 能够有效地介导抗原蛋白HBcAg 在DC 内高水平表达,加入HFP3 辅助感染能在较低的感染剂量下获得较高的感染效率,有利于维持DC 的活性.重组腺病毒载体CHB3 结合HFP3 的抗原负载方案能有效地诱导HBcAg 特异性CTL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周向军		3	6	2.0	2.0
2	李进		3	4	2.0	2.0
3	陶然		1	0	0.0	0.0
4	张克	广东省南方医科大学附属南方 医院感染内科	1	0	0.0	0.0
5	马世武	广东省南方医科大学附属南方 医院感染内科	1	0	0.0	0.0
6	姜维		1	0	0.0	0.0
7	李溢柔		1	0	0.0	0.0