Trx-ASK1在多柔比星诱导的乳鼠心肌细胞凋亡中的作用

• 作者: 李悦山 黄海高
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多柔比星 硫氧还蛋白 凋亡信号调节激酶1 心肌细胞 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1028-1033
• 分类号: R96
• 字数: 4966字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2012.06.013

摘要

目的:探讨硫氧还蛋白-凋亡信号调节激酶1(Trx-ASK1)在多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导的乳鼠心肌细胞凋亡中的作用.方法:体外分离原代新生SD大鼠心肌细胞,待细胞可见搏动率大于95%、预孵育抗氧化剂ebselen(Ebs)后,给予DOX(1 μmol/L)作用24 h.MTT检测细胞存活率;活性氧簇(ROS)敏感的荧光探针2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酯 (H2DCFDA)检测细胞内ROS含量;细胞凋亡荧光Hoechst 33258试剂盒进行凋亡检测;凋亡试剂盒检测caspase-3的活性;Western blotting法检测聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶1[poly(ADP-ribose)polymerase 1,PARP1]、ASK1、p-ASK1、p38和p-p38;免疫沉淀法检测Trx-ASK1是否发生分离.结果:乳鼠心肌细胞给予DOX后细胞内ROS量明显增多,荧光染色可以观察到明显凋亡,给予抗氧化剂Ebs后凋亡得到明显改善.与正常组相比,凋亡组caspase-3活性明显升高(P<0.01);PARP1、ASK1和p38等蛋白活化形式表达增加(P<0.01);Trx-ASK1的分离显著增加(P<0.01).Ebs保护组与凋亡组相比,caspase-3活性明显降低(P<0.05);PARP1、ASK1和p38等蛋白活化形式表达减少(P<0.01);Trx-ASK1分离明显减少(P<0.05).结论:给予DOX后心肌细胞可发生明显的凋亡,Trx与ASK1发生了一定程度的分离,从而使得ASK1介导的凋亡信号通路参与了该凋亡过程,给予Ebs后凋亡得到明显改善.本研究充分说明Trx-ASK1在DOX诱导心肌细胞凋亡过程中发挥着重要的作用,这将有助于进一步研究DOX诱导心肌细胞凋亡的机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李悦山	广州医学院药理教研室	18	127	6.0	11.0
2	黄海高	广州医学院药理教研室	1	2	1.0	1.0