硫氧还蛋白硝基化在多柔比星诱导的乳鼠心肌细胞凋亡中的作用

• 作者: 李悦山 王斌
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多柔比星 硫氧还蛋白 硝基化 心肌细胞 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1358-1364
• 页数: 7页
• 分类号: R96
• 字数: 4970字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2013.08.003

摘要

目的:探讨硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)硝基化在多柔比星诱导的乳鼠心肌细胞凋亡过程中的作用.方法:体外分离培养新生SD大鼠心肌细胞,直接给予多柔比星刺激和预孵育过氧亚硝基阴离子(ONOO-)清除剂锰(Ⅲ)四(1-甲基-4-吡啶基)卟啉(MnTMPyP)后再给予多柔比星刺激.MTT检测细胞存活率,细胞凋亡荧光Hoechst 33258试剂盒检测细胞凋亡情况,分光光度法检测caspase-3的活性,Western blotting法检测聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶l剪切片段[cleaved poly(ADP-ribose) polymerase-1,cleaved PARP-1]、凋亡信号调节激酶l(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)、磷酸化ASK1(p-ASKl)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)和磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)的表达,免疫沉淀法检测Trx-NT和Trx-硝基酪氨酸的形成.结果:给予多柔比星后,心肌细胞Hoechst荧光染色观察到明显凋亡,MnTMPyP预保护后,凋亡情况减轻.多柔比星组与正常组相比,Trx硝基化水平升高,caspase-3活性、cleaved PARP-1和p-p38 MAPK表达增加(P＜0.05),TrxASK1和p-ASK1表达减少(P＜0.05).MnTMPyP预保护组与多柔比星组相比,Trx硝基化水平降低(P＜0.05),caspase-3活性、cleaved PARP-1和p-p38 MAPK表达降低(P＜0.05),Tx-ASK1和p-ASK1表达增加(P＜0.05).结论:多柔比星刺激心肌细胞后,Trx硝基化水平和细胞凋亡明显增加;给予ONOO-清除剂MnTMPyP后,Trx硝基化程度和凋亡情况得到明显改善.Trx硝基化可能是多柔比星诱导心肌细胞凋亡的机制之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李悦山	广州医科大学药理教研室	6	26	2.0	5.0
2	王斌	广州医科大学药理教研室	19	46	3.0	5.0