北美香柏叶的乙醇提取物阻断A549细胞增殖并引起细胞凋亡的体外研究

• 作者: Anisur Rahman Khuda-Bukhsh Avijit Paul Avinaba Mukherjee Kausik Bishayee Naoual Boujedaini Samrat Ghosh Sourav Sikdar
• 来源期刊: 中西医结合学报
• 关键词: 金钟柏属 植物提取物 癌,非小细胞肺 细胞增殖 细胞凋亡 抗肿瘤药,植物 体外研究
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 1451-1459
• 页数: 9页
• 字数: 1140字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3736/jcim20121218

摘要

目的:研究北美香柏叶的乙醇提取物对非小细胞肺癌A549细胞的抗肿瘤及抗增殖作用.方法:噻唑蓝法检验不同剂量北美香柏叶的乙醇提取物对细胞活性的影响.确定半数最大抑制浓度为282 μg/mL,另外选择两个浓度188 μg/mL和376 μg/mL进行剂量依赖性检测.进行溴脱氧尿苷结合实验和细胞迁移实验检测药物的抗肿瘤细胞增殖活性.膜联蛋白V-异硫氰酸荧光黄-碘化丙啶双染色后采用荧光激活细胞分类分析仪对细胞早期凋亡进行检测.Hoechst 33258及吖啶橙-溴化乙啶荧光染色法进行DNA片段分析.间接酶联免疫吸附法分析Bax-Bcl2的调节和表达情况.逆转录聚合酶链反应检测caspase 3基因表达情况,其活性和蛋白水平的表达则使用间接酶联免疫吸附法和蛋白印迹法进行检测.结果:A549的细胞活性在暴露于北美香柏叶的乙醇提取物24 h后呈剂量依赖性下降.脱氧尿苷结合实验和细胞迁移实验表明细胞的增殖活性与暴露于药物的时间有时间依赖性关系.11.72％的细胞在双染色后呈阳性反应,表明药物引起了细胞的早期凋亡.药物作用24 h后DNA片段彗星尾的出现以及Hoechst33258荧光染色的增加提示显著的DNA缺口出现以及染色质凝聚.Bax的上调及Bcl2的下调表明了细胞凋亡的出现.逆转录聚合酶链反应、间接酶联免疫吸附法以及蛋白印迹法的检测结果表明caspase 3的活性随着抗聚(腺苷二磷酸-核糖)聚合酶的表达的增加而增加.结论:北美香柏叶的乙醇提取物能够促进A549细胞凋亡并抑制其增殖活性.