SOCS1沉默的树突状细胞疫苗在喉癌治疗中的实验研究

• 作者: 张扬 栾宁 王家玉 王雪峰 远洋
• 来源期刊: 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞因子信号转导抑制因子1 RNA干扰 DC疫苗 喉肿瘤
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 169-173
• 页数: 5页
• 分类号: R739.65
• 语种: 中文

摘要

目的:研究SOCS1沉默的树突状细胞(DC)疫苗特异性抗肿瘤作用机制,并探讨RNAi技术在喉癌基因治疗中的应用前景,为DC的临床应用提供新思路.方法:以细胞因子GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导扩增外周血单核细胞来源的DC,倒置显微镜下观察DC形态特征；构建RNAi载体转染DC,Western blot检测SOCS1的表达情况,筛选抑制SOCS1表达的有效靶序列；流式细胞术检测DC表面分子CD83、CD86和HLA-DR 的表达；ELISA法分析上清中1FN-γ的含量；MTT法评估DC刺激T细胞增殖的能力及诱导细胞毒性T细胞(CTL)的杀伤活性.结果:DC体外诱导培养成功；设计的RNAi载体经测序验证无误.干扰序列5可显著下调SOCS1表达水平；SOCS1沉默联合喉癌Hep-2抗原致敏的DC可显著上调表面分子标志CD83(85.61士0.96)％、CD86(96.86±1.20)％和HLA-DR(98.02±0.94)％的表达；该组DC能有效刺激T细胞增殖,增加IFN-γ的分泌量,最终增强CTL的特异性杀伤作用,效靶比为50:1时其杀伤活性与对照组之间的差异有统计学意义(P＜0.01).结论:SOCS1沉默并负载喉癌Hep-2抗原的DC疫苗可以产生高效而特异性的抗喉癌免疫应答.