表达甲型H1N1流感病毒血凝素重组腺病毒的构建及免疫学评价

• 作者: 严敏 孙茂盛 岳磊 李鸿钧 王文举 谢天宏
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 生物学
• 关键词: 甲型H1N1流感病毒 血凝素 重组腺病毒 免疫原性
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 308-314
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

构建表达甲型H1N1流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)的重组腺病毒,探讨其经滴鼻和肌肉注射免疫小鼠后诱导机体产生特异性免疫应答的sss能力.通过人工合成HA基因,克隆其至穿梭质粒pShuttle-CMV中,经同源重组获得重组腺病毒质粒,转染Ad-293细胞,包装携带H1N1 HA基因的重组腺病毒Ad-HA.RT-PCR和免疫荧光检测HA基因在Vero细胞中成功的转录和表达.CsCl密度梯度离心纯化重组腺病毒,通过鼻腔免疫和肌肉注射免疫小鼠,ELISA法检测免疫小鼠血清中抗HA抗体滴度.结果显示Ad-HA通过鼻腔免疫和肌肉注射两种途径均能刺激小鼠产生抗HA的抗体,鼻腔免疫能在初次免疫后两周刺激机体产生抗体,最高抗体效价可达1:103,4,而肌肉注射初次免疫两周后未出现明显的免疫应答,加强免疫后抗体水平出现明显的上升,最高抗体效价可达1:104.结果表明表达甲型H1N1流感病毒HA蛋白的重组腺病毒通过肌肉注射和滴鼻免疫两种途径均能刺激小鼠产生针对HA的IgG抗体.