DNMT3B对人脐带间质干细胞成骨分化能力的影响

• 作者: 吴周睿 孙晓晴 徐委 程黎明 管晓菲 胡笑
• 来源期刊: 外科研究与新技术
• 学科: 医学
• 关键词: 骨生成 间质干细胞 DNA甲基化转移酶3B DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 103-107
• 页数: 5页
• 分类号: R681.5+3
• 字数: 3062字
• 语种: 中文

摘要

目的 研究DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)调控人脐带间质干细胞骨生成的作用.方法 利用RNA干扰法获得两株DNMT3B基因低表达的人脐带间质干细胞(Human Umbilical Mesenchymal Stem Cells,hUMSCs).在使用qPCR和免疫组织化学法确定DNMT3B表达缺失后,对hUMSCs进行骨生成定向诱导分化.并利用免疫组织化学法和茜素红染色评价突变型和野生型hUMSCs成骨能力差异.结果 由RNA干扰获得的两株突变型hUMSCs中两株突变型中DNMTI3B表达量分别下降至野生型hUMSCs的12.67 ±0.45％和35.60 ±0.76％(P ＜0.05).而在DNMT3B突变型hUMSCs中间质干细胞标记物CD73和CD90基因mRNA的表达水平也分别下降(P＜0.05).CD73水平分别是野生型细胞的15.83 ±0.44％和16.60±0.37％(P ＜0.05)；CD90的水平分别是野生型细胞的35.23 ±0.30％和58.64±0.71％(P ＜0.05).在骨生成过程中,免疫组化染色后镜下比较显示DNMT3B突变型的细胞表达Osteocalcin较正常细胞低,qPCR结果表明RUNX2,IBSP和ALPL基因的mRNA表达量水平较正常细胞均明显下降(P＜0.01),其中shD3B-1和shD3B-2的RUNX2基因表达水平分别为正常细胞的55.09±0.53％和53.77 ±0.47％(P＜0.01)；IBSP基因表达水平分别为正常细胞的53.21 ±0.81％和41.75±0.44％(P＜0.01)；ALPL基因表达水平分别为正常细胞的15.55±0.10％和17.86±24％(P＜0.01).同时茜素红染色检测也显示其成骨后细胞成骨功能减弱.结论 DNMT3B突变或缺失会导致hUMSCs骨生成能力下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程黎明	同济大学附属同济医院脊柱外科	99	600	13.0	20.0
2	吴周睿	同济大学附属同济医院脊柱外科	6	6	1.0	2.0
3	胡笑	同济大学附属同济医院脊柱外科	12	53	3.0	7.0
4	管晓菲	同济大学附属同济医院脊柱外科	10	111	7.0	10.0
5	孙晓晴	同济大学附属同济医院脊柱外科	2	1	1.0	1.0
6	徐委	同济大学附属同济医院脊柱外科	8	67	3.0	8.0