红细胞膜蛋白颗粒冷冻蚀刻图像反差不良的原因分析

• 作者: 林曦 钟秀容 陈新
• 来源期刊: 中国医学物理学杂志
• 关键词: 冷冻蚀刻 膜蛋白颗粒 反差不良 喷镀源
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 医学生物物理与临床应用
• 页码范围: 3818-3821
• 页数: 4页
• 分类号: R318.52
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-202X.2012.06.025

摘要

目的:探讨了红细胞膜蛋白颗粒冷冻蚀刻图像反差不良的相关因素,解决在应用电镜冷冻蚀刻技术制备红细胞膜蛋白颗粒样品的过程中,部分颗粒图像模糊、反差不良,颗粒粘连严重,导致辨识与计数困难的问题.方法:本实验通过采集DMD基因携带者外周静脉血样品,经过抗凝、离心、固定和防冰晶等处理步骤后,应用HUS-5型真空喷镀仪及配套装置,在-100℃条件下制备复型膜.在以往工作的基础上,分析蛋白颗粒图像成因,采取在喷镀过程中控制喷镀电流与真空度,以及在喷镀前精选喷镀源,并在仪器准备阶段注重真空系统良好的清洁和维护等多种手段,制备出了质量良好的冷冻蚀刻复型膜.结果:制备出的复型膜在电镜下显示的蛋白颗粒图像清晰可辨,反差良好.部分改善了图像质量,收到良好的效果.结论:采用精心烧制并优选喷镀源,在冷冻蚀刻实验过程中注重喷镀电流与真空度的配合,结合改进实验器材的准备工作等方法,可提高膜蛋白颗粒冷冻蚀刻图像的质量,制备出边界清晰,背景杂质较少,易于识别的蛋白颗粒复型膜.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林曦	福建医科大学基础医学院病理学系电子显微镜室	50	119	6.0	9.0
3	陈新	福州大学物理与信息工程学院	124	559	12.0	16.0
4	钟秀容	福建医科大学基础医学院病理学系电子显微镜室	78	560	12.0	20.0