艾滋病猴特异性细胞免疫的胞内细胞因子检测方法优化与应用

• 作者: 丛喆 刘克剑 吴芳新 熊竞 王卫 魏强
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: SIV 特异性细胞免疫 胞内细胞因子染色 优化
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 18-23
• 分类号: Q95-33
• 字数: 5278字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2012.01.005

摘要

目的 为准确检测艾滋病猴模型特异性细胞免疫,优化、确定胞内细胞因子染色(ICS)影响因素和条件.方法 使用三种多克隆激活剂分别刺激SIV感染猴外周血单个核细胞(PBMC),确定最佳阳性刺激物和刺激时间；然后使用五种浓度SIVmac239混合肽库分别刺激SIV感染猴PBMC,体外培养,不同时间点进行细胞染色和流式检测,确定肽库的最适刺激浓度和最佳刺激时间.最后,初步应用该方法检测SIV感染猴细胞免疫水平.结果 PMA+离子霉素组合可用作本实验的阳性刺激物；2μg/mL肽库,37℃5％ CO2培养16 h,能更有效的刺激T细胞分泌TNF-α、IL-2、IFN-γ.结论 该方法的优化对艾滋病药物的临床前评价和疫苗研发等研究具有重要意义.