重症肌无力患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库的构建及分析

• 作者: 关兵峰 崔新征 张清勇 方华 杨俊红 赵国强 高峰
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 抑制性消减 重症肌无力 差异基因 cDNA文库 胸腺
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 系列研究
• 页码范围: 295-299
• 分类号: R746.1
• 字数: 3238字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2012.03.005

摘要

目的:构建重症肌无力(MG)患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库,分析MG胸腺差异表达基因.方法:分别从6例正常和6例MG患者胸腺组织中分离出mRNA,逆转录合成cDNA,行抑制性消减杂交,将得到的差异表达基因进行T-A克隆,构建cDNA文库,并进行序列分析.应用实时荧光定量PCR检测20例MG患者、10例正常对照胸腺组织中GSTM3和KPNA5 mRNA的表达.结果:共获得125个阳性克隆;Blast同源性检索共得到27个差异表达基因;MG患者GSTM3、KPNA5基因表达量(0.671±0.097和0.712±0.080)高于正常对照胸腺(0.582±0.047和0.571±0.018),差异有统计学意义(tGSTM3=5.458,P<0.001;tKPNA5=2.755,P=0.010),与消减文库结果一致.结论:成功建立了MG胸腺组织抑制性消减cDNA文库.