光滑假丝酵母菌感染实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 曾方银 王前 郑磊 龙燕
• 来源期刊: 感染、炎症、修复
• 学科: 医学
• 关键词: 真菌 光滑假丝酵母菌 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 74-78
• 分类号: R446.5
• 字数: 5380字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8521.2012.02.003

摘要

目的:建立、优化快速检测临床标本中光滑假丝酵母菌的实时荧光定量PCR方法,并评价其临床应用价值.方法:以光滑假丝酵母菌ITSⅡ基因的一段高度保守序列为扩增靶序列,合成引物和探针,并与pMD19-T构建重组质粒作为标准品,建立检测光滑假丝酵母菌的实时定量荧光PCR方法.从线性范围、重复性、敏感性、特异性等4个方面对反应体系进行方法学评价.用建立的实时荧光定量PCR方法对1 042例临床标本(包括血液、尿液、痰液、胸水、支气管肺泡灌洗液)进行检测,并与真菌培养法进行比较.结果:建立的光滑假丝酵母菌实时荧光定量PCR方法的灵敏度可达10 CFU/ml；与人类基因组、细菌及其他真菌无交叉阳性反应.重复检测样本,其循环阈值的试验内及试验间变异系数均小于10％.用于临床标本检测时共检出96份阳性标本,与真菌培养法(检出93份阳性标本)的一致性好(Kappa值为0.925).结论:实时荧光定量PCR方法检测光滑假丝酵母菌灵敏度高、特异性及重复性好；可直接用于各种临床标本中光滑假丝酵母菌的检测,能大大缩短报告时间,为临床诊断提供可靠依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王前	南方医科大学南方医院检验医学中心	261	1480	18.0	23.0
2	曾方银	南方医科大学南方医院检验医学中心	69	331	9.0	13.0
3	郑磊	南方医科大学南方医院检验医学中心	192	1001	14.0	18.0
4	龙燕	南方医科大学南方医院检验医学中心	13	109	4.0	10.0