alfAFP和spCEMA融合基因表达载体的构建及其对小麦的遗传转化

• 作者: 康振生 张立 王建锋 王晓杰 韩德俊
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦 转基因 融合基因 共转化
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 页码范围: 15-20
• 分类号: S512
• 语种: 中文

摘要

以小麦品种西农1376为受体,利用Overlapping PCR的方式构建了防御素基因alfAFP和抗菌肽基因spCEMA融合基因的表达载体,与pAHC20共转化幼胚愈伤组织,获得转基因再生T0代植株269株,春化后移栽成活188株。对叶片基因组DNA进行目的基因和bar基因PCR扩增表明其中7株是共整合植株,共整合频率为0.1%,初步证明融合基因已成功通过共转化方式导入受体小麦品种中。影响共整合率的因素分析表明,在使用除草剂PPT对bar基因进行筛选的过程中,筛选时间的缩短并不会明显降低筛选的效率。