携人IL-12基因腺病毒的构建及其对Hep3B 细胞增殖及TGF-β表达的影响

• 作者: 匡文斌 成凤 李朴 梁勤东 涂植光 王秦 秦晓林 范晓卿 董晋豫
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白介素12 转化生长因子 细胞增殖 肝癌细胞
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 402-406
• 分类号: R730.5
• 字数: 3939字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2012.05.005

摘要

目的 构建携带人IL-12的重组腺病毒,观察其对Hep3B增殖及TGF-β表达的影响.方法 PCR扩增IL-12基因,构建穿梭质粒pAdTrack-IL-12;穿梭质粒经Pme I线性化后转化AdEasier Cell,E.coli BJ5183内同源重组;PacⅠ 酶切重组腺病毒质粒,转染AD293,包装病毒;病毒pAd-IL-12感染肝癌细胞Hep3B,以RT-PCR、Western blot检测白介素12的表达;MTT法检测肝癌细胞的增殖情况;RT-PCR检测转化生长因子-β(TGF-β)的表达.结果 成功构建携IL-12基因的重组质粒,并成功包装可高效感染Hep3B的腺病毒pAd-IL-12;RT-PCR以及Western blot结果表明,病毒pAd-IL-12感染Hep3B后可高表达白介素12,并且与对照组相比Hep3B增殖能力显著降低(P＜0.05),TGF-β表达量也降低(P＜0.05).结论 可高表达IL-12的腺病毒包装成功,感染肝癌细胞Hep3B后抑制其增殖,同时也下调TGF-β的表达,为进一步研究IL-12的肿瘤治疗作用奠定了基础.