人脐带间充质干细胞低温冻存后生物学鉴定

• 作者: 刘忠 吕蓉 李素萍 王超 王震 邢昕 郭晓婕
• 来源期刊: 临床输血与检验
• 学科: 医学
• 关键词: 脐带间充质干细胞 低温保存 成骨分化
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 289-294
• 分类号: R392.12
• 字数: 4806字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2012.04.001

摘要

目的 观察人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)经低温冻存复苏后的生物学特性,验证其是否仍具有间充质干细胞的基本特征.方法 用胶原酶和胰蛋白酶消化脐带,分离诱导获得HUC-MSCs,传代培养,取第3代细胞加入冷冻保护剂(10％DMSO+ 40 ％FBS+ 50％DMEM/F12)后将其冻存于-80℃冰箱过夜,再转入液氮气相中保存1个月后复苏.采用倒置显微镜观察复苏后贴壁生长细胞的形态；台盼蓝拒染法比较冻存前后细胞活力；MTT法测定HUC-MSCs的增殖活性,比较冻存前后HUC-MSCs增殖活性的差异；流式细胞仪检测HUC-MSCs经冻存复苏后表面抗原的表达情况；复苏后HUC-MSCs进行成骨诱导分化培养,检验其是否仍具有多向分化潜能.结果 HUC-MSCs经低温保存复苏后,细胞仍保持贴壁生长等外形特征,复苏后HUC-MSCs存活率为91.17％；增殖活性与未冻存细胞比较,差异无统计学意义；细胞表面高表达CD105、CD73、CD71、CD90、CD29、CD44、CD13抗原,低表达或不表达CD34、CD133、CD45、CD14,HLA-DR、CD86、CD83、CD80、CD1α；复苏后HUC-MSCs具有向成骨细胞诱导分化能力,细胞经茜素红、ALP和Von-Kossa's染色呈阳性反应.结论 经冻存复苏后的HUC-MSCs保持了间充质干细胞的基本形态,其表型满足间充质干细胞的基本要求,仍具有向成骨细胞分化的潜能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕蓉		29	157	8.0	11.0
2	刘忠		17	132	7.0	11.0
3	李素萍		18	52	4.0	6.0
4	王震		11	66	4.0	8.0
5	郭晓婕		9	38	4.0	6.0
6	邢昕		5	34	4.0	5.0
7	王超		8	25	3.0	5.0