慢性电刺激对成肌分化的C2C12细胞肌型转换的影响

• 作者: 刘刚 刘熙 姜帆 欧娜 邹仲敏
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 钙调神经磷酸酶 肌球蛋白重链 MHC亚型 电刺激
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 710-714
• 分类号: R322.74|R329.25|R337.5
• 语种: 中文

摘要

目的 研究钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)在低频复合生理频率慢性电刺激(chronic electrical stimulation with lower physiological frequency,CESLPF)对骨骼肌细胞肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)亚型表达的影响.方法 以体外2％马血清诱导小鼠成肌母细胞C2C12成肌分化为模型.实验分3组:对照组、CsA组和KN93组.对照组为正常分化的细胞;CsA组和KN93组在细胞诱导分化3d后,分别用CaN抑制剂环孢菌素A(CsA,8μmol)、Ca2+/钙调蛋白依赖的蛋白激酶(CaMK)抑制剂KN93(6μmol)单一或联合CESLPF(10 +40 Hz,1.5 h/d,共2d)处理.通过RT-PCR、Western blot检测观察成肌分化过程中肌球蛋白重链亚型的表达水平及其转换情况,采用比色法检测CaN的活性.结果 在成功构建的体外成肌分化模型上发现,CsA和KN93能够抑制C2C12细胞MHC Ⅰ的mRNA及蛋白的表达.与分化对照组MHC Ⅰ mRNA相对表达量(0.79 ±0.04)相比,CsA组(0.62±0.03)和KN93组(0.69±0.05)能够抑制C2C12细胞MHC Ⅰ型纤维的表达(与对照组比P＜0.05);对照组、CsA和KN93处理组MHC Ⅰ蛋白相对水平分别是(0.91±0.05)、(0.36±0.01)和(0.66±0.02).对照组MHCⅡb相对表达量为(0.53±0.01),CsA(0.63±0.02)和KN93 (0.75±0.03)促进MHCⅡb型纤维的表达(与对照组比较,P＜0.05);CESLPF能够逆转上述改变(与对照组比较,P＞0.05).CsA能够抑制CaN的活性表达;CESLPF能够显著提高CaN活性(P＜0.05),但仍显著低于正常水平(P＜0.05).结论 CaN和CaMK是骨骼肌细胞MHCⅡ型向MHC Ⅰ型转变的重要调控酶,CESLPF可能是经CaN通路和非CaN通路联合作用促进肌型转换,该结果为临床应用CESLPF治疗OSAS提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹仲敏	第三军医大学西南医院呼吸内科	57	215	7.0	11.0
2	刘熙	第三军医大学西南医院呼吸内科	4	13	2.0	3.0
3	欧娜	第三军医大学西南医院呼吸内科	2	7	1.0	2.0
4	刘刚	军事预防医学院毒理学研究所	1	6	1.0	1.0
5	姜帆	军事预防医学院毒理学研究所	1	6	1.0	1.0