干细胞因子及受体c-kit对A375细胞增殖和凋亡影响的体外研究

• 作者: 吴冬梅 岑瑛
• 来源期刊: 实用皮肤病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黑素瘤,转移性 干细胞因子 受体,干细胞因子 稳定转染 A375细胞
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 193-198
• 分类号: R393|R739.5
• 字数: 5185字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-1293.2012.04.001

摘要

目的 利用基因工程方法建立稳定表达干细胞因子受体(SCF/c-kit)的恶性黑素瘤A375细胞株,再给予外源性SCF/c-kit,观察其对A375细胞增殖、凋亡的影响.方法 通过脂质体转染技术构建稳定表达c-kit的黑素瘤细胞株(hc-kit/A375),给予A375细胞和hc-kit/A375细胞外源性SCF,将所有的细胞分为A375组、A375-SCF组、hc-kit/A375组和hc-kit/A375-SCF组.应用MTT法及流式细胞仪分析细胞的增殖和凋亡,并应用酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化方法检测肿瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶(MMP)-9及肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达.结果 ①通过脂质体介导能将c-kit-pcDNA3.1neo重组质粒成功转染入黑素瘤细胞,建立稳定表达c-kit的黑素瘤细胞株hckit/A375,hc-kit/A375细胞中c-kit表达明显增加.②给予外源性SCF后,细胞的生长受到抑制,以培养后第5天尤为显著；细胞的凋亡率明显增加,S期比例降低,且hc-kit/A375-SCF组尤明显.③转染后细胞及加入SCF干预组VEGF、MMP-9分泌减少,而TNF-α的分泌增加.结论 通过脂质体转染和G418筛选成功构建稳定表达c-kit的A375细胞株；通过增加A375细胞中SCF/c-kit的表达能改变肿瘤细胞对VEGF、MMP-9、TNF-α的分泌,抑制肿瘤细胞的增殖,促进其凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴冬梅	四川省人民医院皮肤外科	12	28	3.0	4.0
2	岑瑛	四川大学华西医院烧伤整形科	220	895	14.0	19.0