甜菜夜蛾围食膜几丁质结合蛋白SeCBP66在不同体系中的表达

• 作者: 刘彬 单鸣 孙伟明 徐大庆 李瑞军 赵丹 郭巍
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 甜菜夜蛾 SeCBP66蛋白 原核表达系统 毕赤酵母表达系统 昆虫细胞系
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 页码范围: 80-84
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

分析甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)围食膜几丁质结合蛋白SeCBP66氨基酸序列,利用PCR技术扩增获得缺失信号肽编码区围食膜几丁质结合蛋白的基因△(s)-secbp 66.将△(s)-secbp 66克隆到表达载体pET28a和pPIC9K,分别转化大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115进行原核及真核表达；将△(s)-secbp 66克隆到质粒pFastBacTM,转化大肠杆菌DH10Bac构建重组Bacmid,转染昆虫细胞系Sf9及BTI-TN-5B1-4(HighFive)从而在昆虫细胞系中进行表达.结果表明:SeCBP66在原核细胞中未见表达,在酵母细胞中表达产物呈弥散状,而在昆虫细胞系中则能稳定的表达116 kDa的特异蛋白.