Angeli盐对二氢硫辛酰胺脱氢酶的可逆性灭活作用

• 作者: Michael J Forster 刘莉 晏良军
• 来源期刊: 生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Angeli盐 二氢硫辛酰胺脱氢酶 线粒体 硝基阴离子(HNO) S-硝基化作用
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 341-350
• 页数: 10页
• 分类号: Q7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1260.2012.20046

摘要

二氢硫辛酰胺脱氢酶( dihydrolipoamide dehydrogenase,DLDH)是线粒体3个α-酮酸脱氢酶复合物(丙酮酸脱氢酶复合物、α-酮戊二酸脱氢酶复合物、支链氨基酸脱氢酶复合物)的关键成分,属于吡啶依赖性二硫化物氧化还原酶类,对活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)和活性氧自由基(reactive oxygenspecies,ROS)造成的氧化修饰非常敏感.本研究探索由Angeli盐所产生的RNS对DLDH的修饰作用及机制.将大鼠脑线粒体分离,与不同浓度的Angeli盐作用,应用分光光度计、蓝色胶、基于二维电泳的蛋白质组学等手段,测定DLDH酶活性.结果显示,Angeli盐呈浓度依赖性方式灭活DLDH,过氧亚硝酸盐在同样条件下对DLDH酶活性无抑制作用,说明Angeli盐对DLDH的作用可能是非随机的.由于Angeli盐在生理pH条件下可分解为硝基阴离子(nitroxyl anion,HNO)和一氧化氮(nitric oxide,NO),故进一步分析了Angeli盐对DLDH的灭活作用是否由HNO引起,结果证实确实如此.最后,二维电泳Westem blot结果显示,Angeli盐对DLDH的灭活伴随着DLDH蛋白质的S-亚硝基硫醇形成,提示S-亚硝基硫醇化可能是导致DLDH酶失活的原因.综上,本研究为研究Angeli盐灭活DLDH的机制提供了新证据.