pEGFP-N2-ECM1重组质粒的构建及其在人肝癌细胞系SMMC-7721中的表达

• 作者: 任维华 李建生 荚卫东 董训忠 许戈良 陈浩
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞外基质蛋白-1 肝癌细胞 基因表达
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 133-136
• 分类号: R735.7|R394.33
• 字数: 3186字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2012.02.007

摘要

目的 构建细胞外基质蛋白-1(ECM1)稳定表达的SMMC-7721肝癌细胞系.方法 应用PCR和DNA重组技术构建pEGFP-N2-ECM1真核表达载体,经酶切、测序鉴定正确后,用脂质体转染SMMC-7721细胞,G418药物筛选稳定转染的细胞系.荧光显微镜检测融合蛋白表达,RT-PCR技术检测ECM1基因表达.结果 构建的重组质粒经双酶切及测序分析鉴定,结果 证实pEGFP-N2-ECM1构建成功;筛选获得稳定表达ECM1的SMMC-7721细胞.结论 成功构建了pEGFP-N2-ECM1的真核表达载体,并在肝癌SMMC-7721细胞中稳定表达,为研究ECM1在肝癌进展中的作用奠定了实验基础.