小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞体外扩增

• 作者: 刘蒙 刘飞 夏雷鸣 宋玲 杨明珍
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 雷帕霉素 CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞 IL-10 TGF-β1
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 109-113
• 分类号: R392.4
• 字数: 4651字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2012.02.003

摘要

目的:本研究旨在探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞体外扩增的方法.方法:采用磁珠分选小鼠CD4+T细胞,αCD3单克隆抗体包被24孔板,加入αCD28单克隆抗体、雷帕霉素、rhIL-2,培养3周后,流式细胞仪测定培养细胞中CD4+CD25+T细胞的含量,实时定量PCR检测CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达;单向混合淋巴细胞反应和增殖抑制试验测定扩增的CD4+CD25+T细胞的增殖及其抑制功能;ELISA检测培养上清中IL-10和TGF-β1的含量.结果:小鼠CD4+T细胞培养3周后,CD4+CD25+T细胞达(76.05±2.73)%,高于未加雷帕霉素组(52.17±1.36)%(P＜0.001),磁珠分选的CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达是未加雷帕霉素组的5倍(P＜0.001),增殖能力是未加雷帕霉素组的0.29倍(P＜0.001),对CD4+T细胞增殖抑制能力是未加雷帕霉素组的3.6倍(P＜0.001),培养上清中IL-10和TGF-β1分别是对照组的1.8倍和1.6倍(P＜0.001).结论:小鼠CD4+T细胞在含有1 μg/ml的αCD28、rhIL-2 100 U/ml和终浓度为10 nmol/L雷帕霉素的培养体系中培养3周后能有效扩增CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘飞	安徽医科大学第一附属医院血液科	26	110	6.0	9.0
2	杨明珍	安徽医科大学第一附属医院血液科	55	257	9.0	12.0
3	刘蒙	安徽医科大学第一附属医院血液科	3	6	2.0	2.0
4	宋玲	安徽医科大学第一附属医院血液科	6	13	2.0	3.0
5	夏雷鸣	安徽医科大学第一附属医院血液科	6	8	2.0	2.0