免疫荧光双重标记检测奶牛乳腺整联蛋白α5、β1亚基表达

• 作者: 刘畅 李庆章 赵锋
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 奶牛 乳腺 免疫荧光 整联蛋白 极性
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 46-50
• 分类号: S823
• 字数: 2665字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2012.06.010

摘要

屠宰健康荷斯坦奶牛,制备乳腺组织冰冻切片,免疫荧光双重标记检测,比较单克隆和多克隆α5、β1亚基一抗的特异性(FITC标记二抗),用SMMHC多克隆一抗,TRITC标记二抗特异标识肌上皮细胞来辅助定位靶信号,Hoechst33258复染细胞核,在激光共聚焦显微镜下连续断层扫描并拍照.结果表明,借助对肌上皮细胞和细胞核染色定位清晰可见乳腺结构,α5、β1亚基主要分布在导管和腺泡腔上皮细胞膜、外围肌上皮细胞膜和间质中的成纤维细胞膜上,前者在面向腔和靠近基膜的细胞顶侧和基底侧表达均较强,后者仅在基底侧细胞膜上.对于具有极性分布的细胞膜抗原单克隆一抗定位更准确.α5、β1亚基定位在相同区域表明,α5β1异二聚体具有在导管和腺泡基底侧极性分布的表达特点,α5亚基在面向导管和腺泡腔的上皮细胞顶膜上表达,而β1亚基不表达或弱表达,显示该区域存在非α5β1异二聚体形式的α5亚基.