奶牛乳腺上皮细胞HSP70 mRNA荧光实时定量PCR标准曲线的建立

• 作者: 李建国 李秋凤 赵丽红 高艳霞
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: HSP70 荧光实时定量PCR 质粒
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 89-93
• 分类号: S811.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1573.2010.05.020

摘要

为构建奶牛乳腺上皮细胞HSP70 mRNA表达水平差异的标准品,以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞总RNA为模板,反转录成cDNA,用该cDNA为模板进行PCR,扩增目的基因片段,构建pGEM-T-HSP70重组质粒,鉴定测序后,用荧光PCR构建标准曲线. 结果构建的HSP70质粒经PCR扩增后,得到了明显的259 bp条带,测序结果与目的条带完全一致,且质粒原始浓度为2.5×1010copies/mL,倍比稀释至2.5×103copies/mL,均能得到良好的标准曲线(R＝0.99),提示构建的HSP70标准质粒成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李建国	河北农业大学动物科技学院	224	2151	24.0	34.0
2	李秋凤	河北农业大学动物科技学院	118	825	17.0	22.0
3	高艳霞	河北农业大学动物科技学院	88	421	11.0	15.0
4	赵丽红	河北农业大学动物科技学院	1	8	1.0	1.0