橙皮苷调控Bcl-2/Bax-Caspase3信号通路阻抑H2O2诱导的奶牛乳腺上皮细胞凋亡

• 作者: 刘嘉烁 彭灿 汤少勋 韩雪峰 谭支良
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 奶牛 橙皮苷 乳腺上皮细胞 细胞凋亡 Bcl-2/Bax-Caspase3信号通路
• 年，卷（期）: 2023,（10）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 222-231
• 页数: 10页
• 语种: 中文

摘要

【目的】探析橙皮苷对奶牛乳腺上皮细胞凋亡的阻抑效果及其分子作用机制，为其在促进奶牛乳腺器官生长发育和维持泌乳功能领域的应用提供理论依据。【方法】以1000μmol/L H2O2处理奶牛乳腺上皮细胞8 h构建细胞凋亡模型，再用120μg/mL橙皮苷处理24 h，然后采用CCK-8法测定奶牛乳腺上皮细胞活性，通过激光共聚焦显微镜、流式细胞仪和DNA凝胶电泳检测细胞凋亡情况，利用实时荧光定量PCR检测奶牛乳腺上皮细胞的Bcl-2、Bax和Caspase3基因表达水平，并以Western blotting检测Bcl-2、Bax和Caspase3蛋白的表达变化。【结果】与空白对照组(CK)相比，H2O2组奶牛乳腺上皮细胞活性极显著下降(P<0.01，下同)，发生凋亡的细胞比例极显著升高，且DNA片段呈梯状条带；橙皮苷组奶牛乳腺上皮细胞活性显著升高(P<0.05，下同)，且细胞凋亡程度低，发生凋亡的细胞数目较少。与H2O2组相比，H2O2+橙皮苷组奶牛乳腺上皮细胞活性显著上升，细胞凋亡比例极显著降低，且DNA片段的梯状条带减少。在Bax、Bcl-2和Caspase3基因及其蛋白表达方面，H2O2组奶牛乳腺上皮细胞中的Bax和Caspase3基因及其蛋白表达水平显著或极显著高于CK组，而Bcl-2基因及其蛋白表达水平较低；橙皮苷组奶牛乳腺上皮细胞的Bax和Caspase3基因及其蛋白表达水平显著低或极显著于CK组，Bcl-2基因及其蛋白表达水平则均高于CK组；与H2O2组相比，H2O2+橙皮苷组奶牛乳腺上皮细胞的Bax和Caspase3基因及其蛋白表达极显著下调，而Bcl-2基因及其蛋白表达极显著上调。【结论】橙皮苷通过Bcl-2/Bax-Caspase3信号通路阻抑H2O2诱导的奶牛乳腺上皮细胞凋亡，有效提高细胞活性，故推测橙皮苷对促进乳腺器官发育和维持泌乳能力具有良好的正向效应。